一本久久a精品一区二区,凌晨三点看的片www免费,《我的漂亮老师2》在线观看,美女自卫慰黄网站免费观看

歡迎進入上海聯祖生物科技有限公司網站!
13482402338
新聞中心

news Center

當前位置:首頁  -  新聞中心  -  熒光-PCR法試驗的成功離不開優良的試劑

熒光-PCR法試驗的成功離不開優良的試劑

更新時間:2021-05-12點擊次數:917
   熒光-PCR法是利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數方式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數方式生成模板,從而進入平臺期。將已知濃度的標準品梯度稀釋進行PCR,按照起始DNA量由多到少的順序等間隔得到一系列擴增曲線。Ct值與起始模板數的對數值之間存在線性關系,可以制作標準曲線。未知濃度的樣品也得到Ct值,代入標準曲線,就可以求出未知樣品的起始模板量。
  熒光-PCR法實驗成功的因素離不開優良試劑的選擇:
  1.標準曲線的質量直接影響定量的準確性。建議使用標準品專用稀釋Buffer稀釋標準品。
  2.根據采用的熒光檢測方法進行試劑選擇。選擇探針法專用試劑。
  3.RT-PCR要根據實驗目的進行試劑選擇。mRNA表達量分析選擇兩步RT-PCR試劑,病毒病原菌檢測選擇一步RT-PCR試劑。
  4.PCR反應通常樣品數量較多,操作步驟過多易產生錯誤。選擇PCR反應用Buffer、DNA聚合酶、dNTP等試劑已經預混在一起的試劑,操作更加簡單方便。同時,使用的試劑最好不需要進行Mg2+濃度的優化等實驗。
  5.PCR反應對反應特異性要求高。最好選擇應用DNA聚合酶的試劑。但有一點需要強調,DNA聚合酶有兩種類型,即化學修飾型和抗體結合型。使用這兩種DNA聚合酶的PCR反應條件不同,使用化學修飾型DNA聚合酶,需要在PCR條件的起初步驟設置10-15分鐘的熱變性程序,以恢復DNA聚合酶的活性;而抗體結合型DNA聚合酶,不需長時間的熱變性步驟,通常的PCR條件即可恢復DNA聚合酶的活性,適合快速PCR反應。
  6.所選試劑要與使用的RT-PCR檢測系統相匹配。最好選擇對各種機型裝置都顯示良好反應性能的試劑。

TEL:021-61210612

掃碼加微信

主站蜘蛛池模板: 和龙市| 广东省| 台山市| 嫩江县| 蓬溪县| 古蔺县| 偏关县| 康乐县| 葫芦岛市| 湄潭县| 韶关市| 万荣县| 凤冈县| 揭阳市| 通海县| 江城| 电白县| 阳原县| 简阳市| 扶余县| 榆林市| 望都县| 新密市| 台山市| 佛山市| 柏乡县| 江津市| 南郑县| 阳谷县| 博湖县| 互助| 兴城市| 宿州市| 尉氏县| 法库县| 周至县| 甘谷县| 谢通门县| 古浪县| 宝鸡市| 孝感市|